活细胞的细胞内标记

带外荧光团的活细胞标记

荧光显微镜的技术通常基于使用荧光蛋白或外部荧光团在细胞内部分子的特异性标记。但是,大多数抗体和荧光团都无法跨越活细胞的膜。为了克服外部探针的不渗透性,我们使用链霉菌素O在活细胞中开发了一种细胞内标记的技术,链霉菌素O(一种可在膜上形成毛孔的细菌蛋白)。瞬时透化后,外部抗体和荧光团可以递送到细胞中,然后细胞能够修复其膜。整个过程大约需要20分钟,并提供超过85%的标签效率。该技术开辟了使用各种外部荧光团研究活细胞的可能性。

相关出版物:

  1. Kai Wen Teng,Yuji Ishitsuka,Pin Ren,Yeoan Youn,Xiang Deng,Pinghua GE,Sang Hak Lee,Andrew S. Belmont和Paul Selvin。“使用外部荧光团进行显微镜的活细胞内的蛋白质标记”,Elife,2016; 5:E20378。2016年11月21日接受。doi:10.7554/elife.20378.001